Triagem de aneuploidia

o Triagem de aneuploidia é usado para determinar aberrações cromossômicas numéricas em embriões gerados in vitro que se destinam a implantação. É um exame citogenético, no qual apenas as aberrações numéricas de certos cromossomos podem ser determinadas. A triagem de aneuploidia é, portanto, uma forma de diagnóstico pré-implantação (PGD).

O que é rastreamento de aneuploidia?

O termo rastreio de aneuploidia é usado para resumir os métodos de exame citogenético que podem dar uma indicação de aberrações numéricas em certos cromossomas na fertilização in vitro (FIV). Em princípio, a triagem de aneuploidia pode fornecer indicações de nulossomia, monossomia e polissomia, como B. dar a trissomia.

Na nulossomia, um par de cromossomos está completamente ausente, na monossomia um cromossomo homólogo de um par de cromossomos está ausente e na polissomia há mais de dois cromossomos homólogos para um determinado par de cromossomos. A polissomia mais famosa é a trissomia 21, que leva à síndrome de Down. Uma vez que a maioria das aberrações cromossômicas numéricas - especialmente monossomias - são letais, ou seja, levam a abortos naturais, abortos espontâneos ou natimortos, apenas embriões sem aberrações cromossômicas reconhecíveis são implantados no útero.

Isso deve melhorar a taxa de sucesso da FIV, mas certas aberrações cromossômicas não são necessariamente letais, mas levam a anormalidades e severas restrições na vida adulta, como na síndrome de Down ou Turner. É por isso que alguns países têm uma proibição geral ou restrições severas a este tipo de diagnóstico pré-implantação (PGD) por razões éticas.

Função, efeito e objetivos

A triagem de aneuploidia é usada apenas para fertilização in vitro. O objetivo mais importante é apenas transferir embriões sem aberrações cromossômicas reconhecíveis para o útero, a fim de obter a maior chance possível de sucesso de uma gravidez com inseminação artificial. Em princípio, pode ser feita uma distinção entre os dois métodos de diagnóstico do corpo polar e o exame do embrião pré-implantação. O primeiro método envolve o exame dos corpos polares da célula-ovo que ainda não foi fertilizada.

Apenas a possível aneuploidia do óvulo é verificada aqui. Isso é feito partindo do pressuposto de que cerca de 90% das aneuploidias são de origem materna. Não é um PGD no sentido mais restrito, mas um diagnóstico de prefertilização, porque nenhuma fertilização, ou seja, nenhuma fusão do óvulo com um espermatozóide, ocorreu. A triagem de aneuploidia no embrião pré-implantação em estágio inicial de blástula, por outro lado, se qualifica como PGD porque o exame se refere ao estágio embrionário "real" - mesmo que seja um estágio muito inicial, com apenas alguns dias de vida.

No diagnóstico de corpos polares, os dois corpos polares que o óvulo forma durante a primeira e a segunda meiose antes de se fundir com o espermatozóide são removidos e examinados quanto à aneuploidia. O chamado teste FISH (hibridização fluorescente in situ) é usado para determinar qualquer aneuploidia que possa estar presente. Até agora, o teste FISH só permitiu o exame dos cromossomos 13, 16, 18, 21, 22 e dos cromossomos sexuais X e Y. Os cromossomos da estrutura de dupla hélice se dividem após a meiose se conectam à respectiva sequência de DNA complementar usando sondas de DNA específicas para cromossomos.

As sondas de DNA são marcadas com diferentes cores fluorescentes. Os cromossomos homólogos podem ser contados sob o microscópio de luz em um processo semiautomático para que as aberrações numéricas possam ser identificadas. De forma análoga ao diagnóstico de corpo polar, a triagem de aneuploidia é realizada em embriões pré-implantação, que ainda estão no estágio inicial de blastômero. Agora, no entanto, estamos lidando com conjuntos diplóides de cromossomos, cuja dupla hélice deve primeiro ser dividida para iniciar a conexão dos cromossomos com as sondas complementares de DNA.

O objetivo da triagem de aneuploidia em ambos os métodos continua sendo uma seleção positiva do óvulo fertilizado in vitro antes de ser transferido para o útero, a fim de atingir a maior taxa de sucesso possível para a gravidez desejada. Um problema ético muito discutido surge da seleção negativa, que está automaticamente ligada à seleção positiva e que alguns críticos extremos gostam de usar de argumentos para aproximá-la da eutanásia. Outro problema ético é visto com o uso da FIV para gerar o chamado bebê de resgate. Uma seleção positiva de embriões gerados in vitro pode ser usada para cultivar células-tronco imunocompatíveis onipotentes que podem salvar a vida de irmãos com certas doenças por meio da implantação.

Riscos, efeitos colaterais e perigos

O rastreio de aneuploidia em si, bem como a extração dos núcleos celulares a serem examinados, ocorre fora do corpo e, portanto, não envolve quaisquer riscos ou perigos diretos para a saúde e, portanto, está livre de efeitos colaterais. Os riscos e perigos reais residem no fato de que o benefício da triagem por anoiploidia em blastômeros, ou seja, em embriões pré-implantação, para aumentar a taxa de sucesso em relação à gravidez desejada ainda não foi alcançado.

Problemas gerais e sistêmicos surgem devido a expectativas exageradas da precisão dos resultados da triagem. Isso se aplica tanto ao resultado positivo quanto ao negativo. Um resultado positivo, ou seja, pelo menos uma aberração cromossômica foi encontrada, está associado a uma certa incerteza. Pode acontecer que o resultado positivo exclua erroneamente o óvulo correspondente do transplante, embora na realidade não haja nenhum defeito cromossômico. Esse tipo de diagnóstico incorreto se deve menos ao procedimento em si do que ao fato de que embriões em estágio de blástula podem ter algumas células com aberrações cromossômicas.

Por outro lado, os futuros pais de uma criança FIV não devem ter certeza de que, se o teste de aneuploidia for negativo, não há realmente aberração cromossômica. Outro perigo surge quando o número necessário de células é removido do embrião. Acontece que as células retiradas pela biópsia morrem e não podem mais ser examinadas. Como a biópsia não pode mais ser repetida no mesmo embrião, ela não está mais disponível para transplante porque não há resultado do teste. Também é discutido até que ponto a biópsia afeta a fertilidade do embrião, de modo que a taxa geral de sucesso da gravidez é afetada.