Imunoeletroforese

o Imunoeletroforese é usado para a detecção de diagnóstico laboratorial de anticorpos monoclonais no sangue de um paciente. Os anticorpos monoclonais são derivados da mesma célula e são direcionados contra os mesmos antígenos. Por esse motivo, eles devem ser avaliados como patológicos e, se comprovados, indicam doenças como a doença de Waldenström.

O que é imunoeletroforese?

Os íons têm mobilidade diferente. Esta mobilidade diferente forma a base do procedimento de eletroforese. Esses métodos separam substâncias diferentes umas das outras usando campos elétricos e gravidade. Um método bem conhecido na área é a imunoeletroférese.

Este é um método de diagnóstico qualitativo usado para detectar anticorpos monoclonais. Os anticorpos são substâncias proteicas imunologicamente ativas de uma linha celular específica. Os anticorpos monoclonais são todos baseados nos mesmos linfócitos B e, portanto, são direcionados contra um único epítopo. Cada resposta imune natural a antígenos invasores corresponde a uma resposta policlonal e, portanto, é dirigida contra diferentes epítopos. Uma resposta imune monoclonal, portanto, fornece indicações de processos patológicos do corpo.

Os anticorpos monoclonais ligam-se a diferentes moléculas com alta especificidade. Esta ligação pode ser demonstrada por meio de imunoeletroforese. O procedimento é qualitativo em diagnóstico laboratorial e consiste em dois tipos de procedimento, eletroforese sérica e imunodifusão.

Função, efeito e objetivos

A imunoeletroforese combina a metodologia de eletroforese sérica com imunodifusão. O soro do paciente é colocado em um gel de agarose ou filme de acetato de celulose. Um soro controle também é aplicado. A aplicação é seguida de uma separação eletroforética das amostras. Anti-soros, IgG, IgA, IgM, ácido acético para eletroforese normal e kappa e lambda são aplicados entre as linhas divisórias.

Isso cria uma reação com os anticorpos no soro do paciente, o que cria linhas de precipitação. Dependendo do anti-soro usado e da posição e forma das linhas individuais, podem-se tirar conclusões sobre as imunoglobulinas contidas nas cadeias leves kappa ou lambda. No caso de uma banda lambda, existem cadeias leves livres constituídas por anticorpos. O laboratório fornece evidências adicionais por meio das raras IgE e IgD, que permitem uma determinação exata das imunoglobulinas. Um método de eletroforese de imunodifusão ocorre de acordo com Pierre Grabar e Curtis Williams e corresponde a uma combinação de eletroforese de proteínas em gel de agarose e difusão de anticorpos.

Primeiro ocorre a eletroforese em gel de agarose. Posteriormente, os anticorpos contidos se difundem contra as bandas de antígenos e, assim, criam arcos precipitados. Isso deve ser diferenciado da imunoeletroforese de foguete de acordo com Laurell, que corresponde à eletroforese de proteínas dentro de um gel de agarose, cada uma com anticorpos em uma determinada concentração. Há um tampão levemente básico no gel, que só permite que os antígenos migrem e que força a maioria dos anticorpos ao ponto isoelétrico por meio da exposição ao valor de pH ligeiramente básico até que eles parem de se mover eletroforeticamente.

No início de uma imunoeletroforese de foguete há um excesso de antígeno, de forma que os complexos solúveis antígeno-anticorpo são formados. Durante a eletroforese, também ocorre ligação entre antígenos e outros anticorpos. Dessa forma, imunoprecipitados são formados no ponto de equivalência, que se assemelha a figuras de foguetes com altura proporcional à concentração de antígeno. A altura do precipitado é medida para avaliar o teste.

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Riscos, efeitos colaterais e perigos

A detecção de anticorpos monoclonais é de particular importância para o diagnóstico de mieloma múltiplo e doença de Waldenström. As evidências fornecidas falam de uma degeneração maligna das células do sistema imunológico. O mieloma múltiplo corresponde a um câncer na medula óssea, que se caracteriza pela multiplicação maligna de células produtoras de anticorpos no plasma.

Essas células plasmáticas produzem anticorpos e seus fragmentos. As células plasmáticas malignas sempre vêm de uma célula precursora comum e, portanto, são geneticamente idênticas. Eles apenas produzem anticorpos monoclonais. A malignidade desta doença pode corresponder a um estágio pré-canceroso, mas também pode atingir um estágio altamente maligno, que sem tratamento é rapidamente fatal. Os sintomas da doença resultam do crescimento maligno das células ou dos anticorpos e fragmentos de anticorpos. Os sintomas mais comuns incluem dor óssea, dissolução óssea e fraturas espontâneas.

O nível de cálcio no sangue costuma aumentar. Além disso, os anticorpos anormais são frequentemente depositados no tecido e causam distúrbios funcionais nos órgãos, que podem levar a sintomas como insuficiência renal ou diminuição do fluxo sanguíneo. A doença de Waldström também é uma doença tumoral maligna. Mais precisamente, é uma doença do linfoma maligno que é contada entre os linfomas não-Hodgkin de células B de progressão lenta e quase assintomáticos. Na maioria dos casos, a produção anormal de IgM monoclonal devido à atividade das células do linfoma maligno pode ser detectada na doença.

A doença de Waldenström é extremamente semelhante ao mieloma múltiplo em suas propriedades, mas geralmente mostra um curso mais favorável. A maioria dos pacientes com doença de Waldenström são amplamente assintomáticos no momento em que são diagnosticados. Outros pacientes apresentam sintomas precoces, como fadiga inespecífica ou neuropatias periféricas, que são causadas pela deposição de IgM monoclonal dentro da bainha de mielina. Mesmo pequenas quantidades de IgM podem desencadear polineuropatia. Nenhuma polineuropatia ocorre em outros pacientes, mesmo em níveis elevados. Além disso, podem ocorrer sintomas não específicos, como febre, perda de peso indesejada ou suores noturnos. Dor óssea também é característica.

Devido à superprodução de IgM, o sangue torna-se hiperviscoso, de modo que os sintomas mencionados podem ser associados aos de uma síndrome de hiperviscosidade. Na maioria dos casos, essa tendência ao sangramento se manifesta em sangramentos nasais frequentes, dores de cabeça, mal-estar geral ou visão turva e queixas acústicas. A fim de detectar doenças malignas desse tipo, a imunoeletroférese há muito se tornou um procedimento diagnóstico padrão.