Teste FISH

Do Teste FISH é um teste cromossômico microscópico no diagnóstico pré-natal e de carcinoma de câncer de mama, câncer gástrico e leucemia linfocítica crônica. O teste, cujo resultado está disponível em 1 a 2 dias, pode detectar principalmente anormalidades cromossômicas que podem ser rastreadas até um conjunto alterado de cromossomos em certos cromossomos. O teste é realizado exclusivamente como um teste de acompanhamento ou preliminar para uma análise cromossômica detalhada, cujos resultados estão disponíveis apenas 2 a 3 semanas após a remoção das células.

O que é o teste FISH?

O teste FISH (Hibridização fluorescente in situ) no diagnóstico pré-natal permite tirar conclusões sobre um conjunto alterado de cromossomos para certos cromossomos. Para realizar o teste FISH, são necessárias pelo menos 50 células fetais não cultivadas (células âmnio), retiradas do líquido amniótico (aprox. 2 - 3 ml). Um método alternativo para a obtenção de células adequadas é a coleta de vilosidades coriônicas, na qual as células são retiradas da área de fixação do cordão umbilical por biópsia.

Um procedimento especial permite que as fitas individuais dos cromossomos 13, 18, 21 e os cromossomos X e Y sejam diferenciadas umas das outras por cores fluorescentes, de modo que uma possível trissomia possa ser identificada pela presença de três em vez de duas fitas homólogas de um cromossomo . No câncer gástrico e de mama, o teste FISH pode ser utilizado para verificar se o tumor possui mais de duas cópias do gene HER2 / neu (receptor do fator de crescimento epidérmico humano), o que tem consequências para o tipo de quimioterapia. Nas doenças da leucemia linfocítica crônica, as alterações cromossômicas mais frequentes em alguns genes podem ser determinadas por meio de várias análises do teste FISH em amostras de medula óssea e sangue periférico, o que também tem impacto na terapia.

Função, efeito e objetivos

Os cromossomos nos núcleos celulares isolados são feitos para dividir sua estrutura de dupla hélice por um tratamento químico especial ou pela ação do calor, e as sondas de DNA específicas dos cromossomos com a respectiva sequência complementar de DNA se conectam aos “seus” cromossomos específicos. As sondas de DNA são marcadas com cores fluorescentes de diferentes cores para que os cromossomos marcados possam ser distinguidos uns dos outros usando um software especial e contados em um processo automatizado.

São conhecidos z. B. Trissomias em que há três em vez de duas fitas cromossômicas para um cromossomo. As chamadas monossomias também são conhecidas nas quais há apenas uma fita do cromossomo X e três ou quatro fitas homólogas de todos os cromossomos. As alterações cromossômicas mais importantes que podem ser detectadas com o teste FISH no diagnóstico pré-natal são a síndrome de Ullrich Turner (monossomia X), síndrome do triplo X (trissomia ou polissomia X), síndrome de Klinefelter, em que em todas ou uma parte das células somáticas em meninos tem um cromossomo X adicional (XXY em vez de XY), síndrome de Down (trissomia 21), síndrome de Edwards (trissomia 18) e síndrome de Patau (trissomia 13).

A monossomia X, em que as meninas têm apenas um cromossomo X, é geralmente fatal, o que significa que em cerca de 98% dos casos leva a um aborto espontâneo nos primeiros três meses de gravidez. No caso de ocorrer um parto de qualquer maneira, as meninas têm uma expectativa de vida normal, são de inteligência média, mas muitas vezes sofrem de uma série de malformações dos órgãos internos e são principalmente estéreis. A síndrome do triplo X com o conjunto de cromossomos (XXX) afeta apenas meninas. Gravidez e parto normais são possíveis.

As mulheres em sua maioria altas com o cromossomo X triplo podem viver normalmente e geralmente não apresentam anormalidades físicas, embora as dificuldades de aprendizagem não sejam incomuns e ocorram problemas com as habilidades motoras finas. A síndrome de Klinefelter, que pode afetar apenas meninos e homens, é caracterizada por um cromossomo X adicional que está presente em todas as células do corpo ou apenas parcialmente. As características físicas estão acima da altura média com braços e pernas excepcionalmente longos. A síndrome de Klinefelter geralmente leva à redução do crescimento testicular com redução da liberação de testosterona.

A síndrome de Down, sinônimo de trissomia do cromossomo 21, está principalmente associada a certas características físicas e limitações cognitivas. Existem diferentes formas de trissomia 21, das quais a chamada trissomia livre 21 é predominante com aproximadamente 95% dos casos. A trissomia 18 (síndrome de Edwards) causa aborto espontâneo na maioria dos casos, está associada a uma variedade de características físicas e a expectativa de vida é de apenas alguns dias. A trissomia 13 (síndrome de Pätau) também é caracterizada por um grande número de características físicas e desenvolvimentos indesejáveis, que geralmente levam a abortos espontâneos ou natimortos. A expectativa de vida das crianças a termo é de apenas alguns anos.

O objetivo do teste FISH pré-natal é detectar precocemente anormalidades cromossômicas conhecidas, a fim de oferecer aos pais a alternativa de um aborto legal para gestar a criança a termo. No câncer de mama e de fígado, os carcinomas podem ser verificados para um número aumentado do gene HER2 / neu usando o teste FISH. No caso positivo, há um aumento da formação de receptores do fator de crescimento que respondem a certas quimioterapias. Os testes FISH também estão disponíveis para identificar anormalidades genéticas específicas na leucemia linfocítica crônica (LLC) que melhoram a composição de agentes quimioterápicos eficazes.

Riscos, efeitos colaterais e perigos

O teste FISH em si não está associado a quaisquer riscos ou perigos. Apenas a extração das células a serem examinadas por biópsia ou por amostragem do líquido amniótico (amniocentese) está associada a um risco menor de infecção devido à sua natureza invasiva. A especialidade é que o teste de FISH pode revelar alguns defeitos cromossômicos específicos, mas não é certo que não haja aberrações cromossômicas em caso de resultado negativo, uma vez que nem todas as anomalias podem ser detectadas pelo teste de FISH. No caso de um resultado de teste positivo, procedimentos diagnósticos adicionais devem ser seguidos para confirmar o resultado ou rejeitá-lo como falso.