Teste FISH

Do Teste FISH é um teste cromossômico microscópico no diagnóstico pré-natal e de carcinoma de câncer de mama, câncer de estômago e leucemia linfocítica crônica. O teste, cujo resultado está disponível em 1 a 2 dias, pode identificar principalmente anormalidades cromossômicas que podem ser rastreadas até um conjunto alterado de cromossomos em certos cromossomos. O teste é realizado apenas como um teste complementar ou preliminar para uma análise cromossômica detalhada, cujos resultados estão disponíveis apenas 2 a 3 semanas após as células terem sido removidas.

O que é o teste FISH?

O teste FISH (Hibridização in situ fluorescente) no diagnóstico pré-natal permite tirar conclusões sobre um conjunto alterado de cromossomos para certos cromossomos. Para realizar o teste FISH, são necessárias pelo menos 50 células fetais não cultivadas (células âmnio), retiradas do líquido amniótico (aprox. 2 - 3 ml). Um método alternativo para a obtenção de células adequadas é a coleta de vilosidades coriônicas, na qual as células são retiradas da área de fixação do cordão umbilical por biópsia.

Um procedimento especial permite que as fitas individuais dos cromossomos 13, 18, 21 e os cromossomos X e Y sejam diferenciadas por cores fluorescentes, de modo que uma possível trissomia seja perceptível pela presença de três em vez de duas fitas homólogas de um cromossomo . No câncer gástrico e de mama, o teste de FISH pode ser usado para verificar se o tumor possui mais de duas cópias do gene HER2 / neu (receptor do fator de crescimento epidérmico humano), o que tem consequências para o tipo de quimioterapia. Nos casos de leucemia linfocítica crônica, as alterações cromossômicas mais frequentes em alguns genes podem ser determinadas por meio de várias análises do teste FISH em amostras de medula óssea e sangue periférico, o que também influencia a terapia.

Função, efeito e objetivos

Os cromossomos nos núcleos das células isoladas são feitos para dividir sua estrutura de dupla hélice por um tratamento químico especial ou pela ação do calor, e as sondas de DNA específicas do cromossomo com a respectiva sequência de DNA complementar se conectam aos “seus” cromossomos específicos. As sondas de DNA são marcadas com cores fluorescentes de diferentes cores para que os cromossomos marcados possam ser distinguidos uns dos outros usando um software especial e contados em um processo automatizado.

São conhecidos z. B. Trissomias em que há três em vez de duas fitas cromossômicas para um cromossomo. As chamadas monossomias também são conhecidas, nas quais apenas uma fita do cromossomo X está presente e três ou quatro fitas homólogas de todos os cromossomos. As alterações cromossômicas mais importantes que podem ser detectadas com o teste FISH no diagnóstico pré-natal são a síndrome de Ullrich Turner (monossomia de X), síndrome do triplo X (trissomia ou polissomia de X), síndrome de Klinefelter, em que em todas ou algumas das células somáticas em meninos têm um cromossomo X adicional (XXY em vez de XY), síndrome de Down (trissomia 21), síndrome de Edwards (trissomia 18) e síndrome de Patau (trissomia 13).

A monossomia X, em que as meninas têm apenas um cromossomo X, é geralmente fatal, o que significa que em cerca de 98% dos casos leva a um aborto espontâneo nos primeiros três meses de gravidez. No caso de ocorrer um parto de qualquer maneira, as meninas têm uma expectativa de vida normal, são de inteligência média, mas muitas vezes sofrem de uma série de malformações dos órgãos internos e são principalmente estéreis. A síndrome do triplo X com o conjunto de cromossomos (XXX) afeta apenas meninas. Gravidez e parto normais são possíveis.

As mulheres em sua maioria altas com o cromossomo X triplo podem viver normalmente e geralmente não apresentam anormalidades físicas, embora as dificuldades de aprendizagem não sejam incomuns e ocorram problemas com habilidades motoras finas. A síndrome de Klinefelter, que só pode afetar meninos e homens, é caracterizada por um cromossomo X adicional que está presente em todas as células do corpo ou apenas parcialmente.As características físicas estão acima da altura média com braços e pernas excepcionalmente longos. A síndrome de Klinefelter geralmente leva à diminuição do crescimento dos testículos com diminuição da liberação de testosterona.

A síndrome de Down, sinônimo de trissomia do cromossomo 21, está principalmente associada a certas características físicas e a deficiências cognitivas. Existem diferentes formas de trissomia do cromossomo 21, das quais a chamada trissomia do cromossomo 21 é predominante com aproximadamente 95% dos casos. A trissomia 18 (síndrome de Edwards) causa aborto espontâneo na maioria dos casos, está associada a uma variedade de características físicas e a expectativa de vida é de apenas alguns dias. A trissomia 13 (síndrome de Pätau) também é caracterizada por um grande número de características físicas e desenvolvimentos indesejáveis, que muitas vezes levam a abortos espontâneos ou natimortos. A expectativa de vida das crianças a termo é de apenas alguns anos.

O objetivo do teste FISH pré-natal é detectar precocemente anormalidades cromossômicas conhecidas, a fim de oferecer aos pais a alternativa de um aborto legal para gestar a criança. Nos cânceres de mama e de fígado, os carcinomas podem ser verificados para um número aumentado do gene HER2 / neu usando o teste FISH. No caso positivo, ocorre um aumento da formação de receptores do fator de crescimento que respondem a certas quimioterapias. Os testes FISH também estão disponíveis para detectar anormalidades genéticas específicas na leucemia linfocítica crônica (LLC) que melhoram a composição de agentes quimioterápicos eficazes.

Riscos, efeitos colaterais e perigos

O teste FISH em si não está associado a quaisquer riscos ou perigos. Apenas a extração das células a serem examinadas por biópsia ou amostragem do líquido amniótico (amniocentese) está associada a um pequeno risco de infecção devido ao seu caráter invasivo. A especialidade é que o teste de FISH pode revelar alguns defeitos cromossômicos específicos, mas não pode ser garantido que não haja aberrações cromossômicas em caso de resultado negativo, pois nem todas as anomalias podem ser detectadas pelo teste de FISH. No caso de um resultado de teste positivo, procedimentos adicionais de diagnóstico devem ser seguidos para confirmar o resultado ou rejeitá-lo como incorreto.