Do Teste ELISA é um exame de laboratório médico que resulta na chamada reação antígeno-anticorpo. Diferentes antígenos que desempenham um papel na medicina humana ou veterinária podem ser testados. Na Alemanha, apenas institutos de laboratórios credenciados são contratados para realizar o teste.
O que é procedimento?
ELISA é a abreviatura de Ensaio de imunoabsorção enzimática. É, portanto, um nome em inglês, mas tornou-se estabelecido no uso médico alemão.
O teste ELISA é um dos chamados métodos imunológicos dentro dos testes de laboratório médico. O procedimento de teste pode ser usado para detectar moléculas de proteína em uma ampla variedade de fluidos corporais. A detecção dessas moléculas, por sua vez, permite tirar conclusões sobre certas doenças ou quadros clínicos, razão pela qual os médicos também fazem seu diagnóstico dependente do resultado de tal teste ELISA. O procedimento do teste é, portanto, muito importante na prática clínica diária, ambulatorial ou hospitalar.
Os fluidos corporais correspondentes, por exemplo, sangue total ou fluidos das articulações, são enviados diretamente para o laboratório após serem retirados do paciente. As amostras costumam ser muito urgentes, pois o material nativo é considerado sensível e deve ser examinado o mais rápido possível. As chamadas amostras sobrepostas podem levar a resultados falsos negativos porque as proteínas patológicas a serem detectadas foram reduzidas ou completamente quebradas. A chamada pré-análise desempenha um papel importante no ELISA; os resultados suspeitos ou negativos devem ser repetidos novamente se houver sintomas clínicos.
Função, efeito e objetivos
Tubos de ensaio e as chamadas placas de microtitulação são essenciais para o teste correto em um laboratório médico credenciado. Essas placas com reentrâncias semicôncavas finas são feitas de plástico especial e cada uma é revestida com um anticorpo muito específico.
Se o antígeno a ser detectado estiver presente em um fluido corporal a ser examinado, ocorre uma reação específica antígeno-anticorpo de acordo com o chamado princípio de bloqueio e chave. A equipe do laboratório pode inserir o material da amostra nas placas manualmente usando pipetas ou de forma totalmente automática. Nos modernos institutos de laboratórios médicos, apenas sistemas totalmente automatizados são usados para realizar diagnósticos ELISA.
No entanto, eles devem ser monitorados por pessoal treinado, assistentes de laboratório técnico-médico. O denominado controle de qualidade interno e externo também é de responsabilidade da equipe de laboratório, subordinada à equipe médica de medicina laboratorial, epidemiologia de infecções e microbiologia. Após a primeira tentativa, ou seja, após o material ter sido pipetado para as placas, os antígenos específicos na amostra, se presentes, já se ligaram aos anticorpos na placa de plástico.
Isso é seguido por um ciclo de lavagem com solução salina fisiológica, a fim de remover fatores de interrupção, como antígenos ou proteínas indesejáveis do lote. Esta etapa é muito importante para evitar reações falso-positivas. Um resultado supostamente positivo mal interpretado pelo laboratório pode, em certas circunstâncias, ter consequências fatais para o paciente. Na segunda etapa da investigação, um outro anticorpo, que está ligado a uma enzima, é adicionado. Este anticorpo marcado também se liga ao antígeno.
Em uma terceira e última etapa, um corante especial é adicionado em uma quantidade definida, que é decomposta em maior ou menor grau pelos resíduos enzimáticos restantes. Apenas a enzima que não foi previamente ligada ao antígeno juntamente com o anticorpo pode ser decomposta. A enzima livre é capaz de clivar o corante adicionado. A quantidade exata do corante dividido pode ser determinada com outro método de laboratório médico, a chamada fotometria. Isso permite uma conclusão exata sobre se e quanto antígeno está presente em um material de amostra.
O teste ELISA não é utilizado apenas para o diagnóstico inicial ou para fundamentar diagnósticos suspeitos em certas doenças e quadros clínicos, mas também para monitorar sua evolução. Se a concentração de antígeno no teste diminuir no decorrer da terapia, a terapia é considerada bem-sucedida.
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O teste ELISA é particularmente informativo por meio da detecção de estruturas antigênicas em fluidos corporais. O teste permite uma declaração chamada qualitativa, mas também semiquantitativa e quantitativa sobre a presença presumida de certos antígenos nos fluidos corporais.
O sangue total não pode ser usado para o exame, apenas soro sanguíneo. Um teste direto no paciente, por exemplo, do sangue capilar da ponta do dedo, é, portanto, como acontece com alguns outros testes sorológicos, não possível até agora. Na medicina humana, o teste ELISA é usado principalmente para detectar antígenos em infecções bacterianas, virais ou fúngicas. Além disso, todos os resultados positivos da sorologia para hepatite são verificados novamente com um teste ELISA como padrão.
Certos hormônios, como o hormônio da gravidez HCG, também podem ser determinados com o teste ELISA. Se ocorrerem certas complicações durante a gravidez, o conhecimento preciso da concentração do hormônio da gravidez no sangue é muito útil para o diagnóstico e a terapêutica. Outra área de indicação do exame é a detecção das chamadas paraproteínas na urina, já que ocorrem, por exemplo, em várias doenças tumorais como o mieloma múltiplo.
O teste ELISA ainda é realizado em muitos institutos de laboratório hoje, mas é considerado desatualizado por especialistas. A reação imune ligada à enzima no teste ELISA tem sido cada vez mais substituída nos últimos anos por anticorpos marcados radioativamente que fornecem resultados quantitativos ainda melhores. Esses testes também são conhecidos como RIA, Radio Immunoabsorbent Assay. Outros desenvolvimentos específicos adicionais do ELISA são métodos químicos leves, como luminescência ou fluorescência.
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